產(chǎn)品貨號(hào)：DM5040

產(chǎn)品規(guī)格：【48T/96T】

檢測(cè)原理：

酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（Enzyme-Linked Immunosorbent Assay，簡(jiǎn)稱(chēng)ELISA）是一種基于抗原-抗體反應(yīng)的生物化學(xué)分析技術(shù)，廣泛應(yīng)用于檢測(cè)蛋白質(zhì)、抗體、激素、藥物等生物分子。其檢測(cè)原理主要基于以下幾個(gè)關(guān)鍵步驟：

1. 抗原-抗體特異性結(jié)合ELISA的核心是利用抗原與抗體之間的特異性結(jié)合�？乖�和抗體之間通過(guò)互補(bǔ)的結(jié)構(gòu)相互識(shí)別并結(jié)合，這種結(jié)合具有高度的特異性和親和力。例如，如果要檢測(cè)某種特定的蛋白質(zhì)（抗原），就需要使用針對(duì)該抗原的特異性抗體。

2. 固相化技術(shù)ELISA實(shí)驗(yàn)中，抗原或抗體通常被固定在固相載體上（如塑料微孔板）。這種固相化過(guò)程使得抗原或抗體能夠穩(wěn)定地吸附在微孔板表面，便于后續(xù)的反應(yīng)和檢測(cè)。固相化的抗原或抗體被稱(chēng)為“捕獲相”，而加入的樣本中的抗原或抗體則被稱(chēng)為“檢測(cè)相”。

3. 酶標(biāo)記技術(shù)為了實(shí)現(xiàn)檢測(cè)信號(hào)的放大和可視化，ELISA中通常使用酶標(biāo)記的抗體或抗原。常用的酶包括辣根過(guò)氧化物酶（HRP）和堿性磷酸酶（AP）。酶標(biāo)記的抗體或抗原與固相化的抗原或抗體結(jié)合后，酶會(huì)與底物反應(yīng)，產(chǎn)生可檢測(cè)的信號(hào)（如顏色變化或熒光信號(hào)）。

4. 底物反應(yīng)與信號(hào)檢測(cè)酶與底物反應(yīng)后，會(huì)產(chǎn)生顏色變化或熒光信號(hào)。這種信號(hào)的強(qiáng)度與樣本中目標(biāo)分子的濃度成正比。例如，辣根過(guò)氧化物酶（HRP）可以催化過(guò)氧化氫分解，使無(wú)色的底物（如TMB）變?yōu)樗{(lán)色，加入酸終止反應(yīng)后變?yōu)辄S色，通過(guò)分光光度計(jì)測(cè)量吸光度即可定量分析目標(biāo)分子的濃度。

5. 檢測(cè)模式ELISA主要有以下幾種檢測(cè)模式：

直接ELISA：抗原固定在固相載體上，加入酶標(biāo)記的抗體與抗原結(jié)合，通過(guò)底物反應(yīng)檢測(cè)信號(hào)。

間接ELISA：抗原固定在固相載體上，先加入未標(biāo)記的特異性抗體，再加入酶標(biāo)記的二抗（針對(duì)一抗的抗體），通過(guò)底物反應(yīng)檢測(cè)信號(hào)。

夾心ELISA：固相載體上固定捕獲抗體，加入樣本中的抗原，再加入酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體，通過(guò)底物反應(yīng)檢測(cè)信號(hào)。夾心ELISA是檢測(cè)蛋白質(zhì)等大分子常用的方法。競(jìng)爭(zhēng)ELISA：樣本中的抗原與固相載體上的抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合酶標(biāo)記的抗體，通過(guò)檢測(cè)酶標(biāo)記抗體的結(jié)合量來(lái)推斷樣本中抗原的濃度。

6. 定量分析ELISA的檢測(cè)結(jié)果可以通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)進(jìn)行定量分析。標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)是通過(guò)一系列已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)行檢測(cè)，繪制吸光度（或熒光強(qiáng)度）與濃度的關(guān)系曲線(xiàn)。根據(jù)樣本的吸光度或熒光強(qiáng)度，通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)可以計(jì)算出樣本中目標(biāo)分子的濃度。