β淀粉樣肽（1-40）(beta Amyloid 1-40)免疫組化試劑盒

β淀粉樣肽（1-40）(beta Amyloid 1-40)免疫組化試劑盒通常采用抗原抗體特異性結(jié)合的原理。試劑盒中含有針對(duì) β 淀粉樣肽（1-40）的特異性抗體，該抗體能夠與樣本中的 β 淀粉樣肽（1-40）發(fā)生特異性結(jié)合，然后通過(guò)標(biāo)記的二抗與一抗結(jié)合，再利用相應(yīng)的顯色系統(tǒng)顯示出陽(yáng)性信號(hào)，從而實(shí)現(xiàn)對(duì) β 淀粉樣肽（1-40）的檢測(cè)。

β淀粉樣肽（1-40）(beta Amyloid 1-40)免疫組化試劑盒

beta Amyloid 1-40 IHC Kit

貨       號(hào)：XY9-0106M

中文名稱：β淀粉樣肽（1-40）(beta Amyloid 1-40)免疫組化試劑盒

英文名稱：beta Amyloid 1-40 IHC Kit

英文別名：β-Amyloid 1-40; beta Amyloid(1-40); beta-Amyloid 1-40; beta-Amyloid 1-40; Amyloid 1-40; A4; AAA; ABETA; ABPP; AD1; Alzheimers Disease Amyloid Protein; Amyloid B; Amyloid Beta A4 Protein Precursor; Amyloid Beta; Amyloid of Aging and Alzheimer Disease; APP; APPI; B Amyloid; Beta APP; Cerebral Vascular Amyloid Peptide; CTFgamma; CVAP; PN II; PN2; PreA4; Protease nexin II; A beta; A4_HUMAN.  

應(yīng)用范圍：Immunohistochemistry

樣本類型：組織切片

保存條件：見(jiàn)下表。有效期 6 個(gè)月。

產(chǎn)品規(guī)格: 50T   100T 

樣本要求：新鮮活檢樣本組織，中性福爾馬林或多聚甲醛，固定時(shí)間 12-48h，參照病理技術(shù)規(guī)范要求取材、脫水、石蠟包埋并制成蠟塊，蠟塊在常溫條件下保存有效期有 5 年。組織切片厚度為 3-5μm 并黏附在防脫玻片上，輕拍切片架并用吸水紙吸干組織切片中的水滴，再放入 56-60℃恒溫箱中烘烤 2h 后，從恒溫箱中移出玻片放在溫室下冷卻。如果切片在室溫下（15-28℃）保存，為了良好的重現(xiàn)組織中的抗原分布情況，請(qǐng)于切片制作后 7 天內(nèi)完成檢測(cè)。

產(chǎn)品介紹：The cerebral and vascular plaques associated with Alzheimer's disease are mainly composed of Amyloid beta peptides. beta Amyloid is derived from cleavage of the Amyloid precursor protein and varies in length from 39 to 43 amino acids. beta Amyloid [1-40], beta Amyloid [1-42], and beta Amyloid [1-43] peptides result from cleavage of Amyloid precursor protein after residues 40, 42, and 43, respectively. The cleavage takes place by gamma-secretase during the last Amyloid precursor protein processing step. beta Amyloid [1-40], beta Amyloid [1-42], and beta Amyloid [1-43] peptides are major constituents of the plaques and tangles that occur in Alzheimer's disease. beta Amyloid antibodies and peptides have been developed as tools for elucidating the biology of Alzheimer's disease.

[產(chǎn)品組分及規(guī)格：]

編號(hào)	組份	50T規(guī)格	100T規(guī)格	儲(chǔ)存
1	PBS 緩沖液（干粉）	2 L×1袋	2 L×2袋	室溫
2	100×檸檬酸鈉抗原修復(fù)液	16ml	32ml	2-8℃
3	內(nèi)源性過(guò)氧化物酶阻斷劑	3ml	5ml	2-8℃
4	抗體稀釋液（即用型）	3ml	5ml	-20℃
5	beta Amyloid 1-40抗體	50ul	50ul	-20℃
6	封閉用正常山羊血清工作液（即用型）	3ml	5ml	2-8℃
7	生物素標(biāo)記羊抗兔 IgG（即用型）	3ml	5ml	2-8℃
8	辣根酶標(biāo)記鏈酶卵白素工作液（即用型）	3ml	5ml	2-8℃
9	DAB kit（20×）顯色液	0.3 ml	0.5ml	-20℃
10	DAB kit（20×）稀釋液	0.3 ml	0.5ml	-20℃
11	蘇木素染液（即用型）	4ml	6ml	室溫
12	說(shuō)明書(shū)	1 份	1 份

[石蠟包埋組織的免疫組織化學(xué)方案]

實(shí)驗(yàn)操作步驟（以石蠟切片為例）

[儀器、設(shè)備：]

移液槍、免疫組化筆、水浴鍋、計(jì)時(shí)器、孵育濕盒、切片架、蓋玻片、光學(xué)顯微鏡、洗瓶等。

[操作步驟]

1. 脫蠟水化。將石蠟切片置于新鮮二甲苯脫中浸泡 15 分鐘，重復(fù)三次。去除多余的液體后，依次置于無(wú)水乙醇、95%乙醇、90%乙醇、80%乙醇、70%乙醇，各浸泡 5 分鐘，蒸餾水（或自來(lái)水）沖洗 5 分鐘。用 PBS 緩沖液（試劑 1，將干粉溶解于 2L 去離子水中）沖洗切片 5 分鐘，重復(fù)三次。

2. 抗原修復(fù)。將脫蠟水化后的組織切片置于燒杯（或修復(fù)盒）中的耐高溫塑料切片架上，加適量修復(fù)液 1×檸檬酸鈉抗原修復(fù)液（試劑 2，將 100×檸檬酸鈉抗原修復(fù)液加去離子水稀釋成 1×檸檬酸鈉抗原修復(fù)液），液面要浸過(guò)切片組織一定高度，將修復(fù)盒置于沸水中煮沸修復(fù) 15 分鐘后取出玻片，自然涼至室溫。用 PBS緩沖液沖洗切片 5 分鐘，重復(fù)三次。

注意：抗原修復(fù)時(shí)，修復(fù)液務(wù)必保證切片始終浸泡在液體內(nèi)，一般情況：修復(fù)液的量約為 800mL/1 架。

3.阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶。用吸水紙擦干玻片，免疫組化筆在組織周?chē)��?huà)圈，滴加 50μL 內(nèi)源性過(guò)氧化物酶阻斷劑（試劑 3）到切片組織上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，室溫孵育 30 分鐘，用 PBS 緩沖液沖洗切片 5分鐘，重復(fù)三次。

4.血清封閉。用吸水紙擦干玻片，滴加 50μL 正常山羊血清工作液（試劑 5），37℃封閉 20 分鐘，以減少非特異性染色。

5. 一抗孵育。用抗體稀釋液（試劑 4）將一抗原液稀釋成工作液，用吸水紙擦干玻片組織周?chē)�的液體，滴加適量抗體工作液，置于濕盒 4℃孵育過(guò)夜或 37℃孵育 1h-2h。

6. 復(fù)溫。4℃過(guò)夜后從冰箱拿出樣本，在室溫下孵育 15min 復(fù)溫（抗體孵育為 4℃過(guò)夜選用此步驟，如室溫孵育直接進(jìn)入下一步清洗）。用 PBS 緩沖液沖洗切片 5 分鐘，重復(fù)三次。

7. 二抗孵育。吸水紙擦干切片后滴加 50μL 生物素標(biāo)記的羊抗兔 IgG（試劑 6），37℃孵育 20 分鐘，用 PBS緩沖液沖洗切片 5 分鐘，重復(fù)三次。

8. 三抗孵育。吸水紙擦干切片后滴加 50μL 辣根酶標(biāo)記的鏈酶卵白素孵育（試劑 7），37℃孵育 20 分鐘，用 PBS 緩沖液沖洗切片 5 分鐘，重復(fù)三次。

9. 顯色。甩去 PBS 緩沖液，吸水紙擦干切片； 每張切片滴加新鮮配制的 DAB 工作液 50μL（試劑 8：試劑 9：試劑 1=1:1:18 比例配置），孵育 3-5min，光學(xué)顯微鏡下觀察染色結(jié)果，切勿顯色過(guò)深；顯色后用自來(lái)水沖洗切片終止顯色。

10. 復(fù)染。滴加適量蘇木素染液（試劑 10）復(fù)染，孵育 1-5 分鐘，自來(lái)水沖洗 5 分鐘，滴加鹽酸酒精分化液分化 30 秒，自來(lái)水沖洗。

11. 脫水封片。將玻片依次置于 70%乙醇、80%乙醇、90%乙醇、95%乙醇、無(wú)水乙醇，各浸泡 5 分鐘，再將玻片放入二甲苯中浸泡 15 分鐘，重復(fù)三次。玻片取出來(lái)稍晾干，用中性樹(shù)膠封片。

[結(jié)果判斷]

在光學(xué)顯微鏡下對(duì)染色的切片觀察并判斷。蘇木素染細(xì)胞核為藍(lán)色，DAB 顯色的陽(yáng)性表達(dá)為棕黃色。

[注意事項(xiàng)]

1. 檢測(cè)樣本時(shí)需同時(shí)做陰性對(duì)照和陽(yáng)性對(duì)照，以提高實(shí)驗(yàn)的可靠性，否則結(jié)果不可取。

2. 本品中的配套試劑，請(qǐng)不要用其他生產(chǎn)商產(chǎn)品替換使用。

3. DAB 為致癌物質(zhì)，請(qǐng)采取必要的防范措施，現(xiàn)用現(xiàn)配。

4. PBS洗滌液（試劑1）配制后在4℃可保存一周；抗原修復(fù)液（試劑2）及顯色劑（試劑9和10）的工作液需每次實(shí)驗(yàn)時(shí)現(xiàn)用現(xiàn)配。

5. 本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或。

6. 此試劑是否可用于除中性福爾馬林或多聚甲醛之外固定的組織未得到驗(yàn)證。

僅用于科研，不能用于臨床診斷！所有產(chǎn)品僅供科研使用，不得用于人或動(dòng)物的等任何其他用途，不為任何個(gè)人提供產(chǎn)品和服務(wù)。以實(shí)際收貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)，網(wǎng)站說(shuō)明書(shū)僅供參考。

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