人可溶程序性死亡因子(sPD-1)ELISA試劑盒說明書

一、人可溶程序性死亡因子(sPD-1)elisa試劑盒說明書實(shí)驗(yàn)原理

9月25日消息，上海臻科報道：人可溶程序性死亡因子(sPD-1)ELISA試劑盒說明書是采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）。往預(yù)先包被人可溶程序性死亡因子(sPD-1)捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并徹底洗滌。用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的人可溶程序性死亡因子(sPD-1)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計算樣品濃度。

二、人可溶程序性死亡因子(sPD-1)ELISA試劑盒說明書產(chǎn)品優(yōu)勢

1、優(yōu)勢明顯  眾所周知產(chǎn)品具有靈敏度高、特異性強(qiáng)的特點(diǎn)決定的產(chǎn)品好壞，我司產(chǎn)品具有穩(wěn)定的重復(fù)性，吸附性能好,空白值低，并適用于血清血漿 組織勻漿等多種樣本類型的檢測，方法簡單，操作方便，最大限度的節(jié)省了實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)。

2、品質(zhì)保障  產(chǎn)品保證質(zhì)量，出庫質(zhì)檢把控嚴(yán)格，保障提供給客戶的100%是優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品，運(yùn)輸全程跟蹤，公司承諾有任何質(zhì)量問題包退換，誠信經(jīng)營，合作共贏。我們提供實(shí)驗(yàn)室試劑、耗材一站式供應(yīng)服務(wù)，超低價，高品質(zhì)，進(jìn)口品牌全線代理，優(yōu)勢的渠道，我們只做行貨，不用擔(dān)心質(zhì)量問題。售后技術(shù)支持到底！

3、專業(yè)定制  應(yīng)市場需求公司特推出專業(yè)定制酶聯(lián)免疫分析試劑盒服務(wù)，全程有專業(yè)的技術(shù)老師跟蹤并和客戶保持溝通，直到定制成功為止。

4、免費(fèi)代測  公司承諾訂購酶聯(lián)免疫分析試劑盒，享全程技術(shù)指導(dǎo)并可免費(fèi)代測，為您分憂。全程有專業(yè)技術(shù)老師負(fù)責(zé)代測，收到樣本一般7個工作日出結(jié)果。

5、服務(wù)周到  設(shè)立售后服務(wù)中心，24小時及時響應(yīng)，真正做到后顧無憂，不斷完善服務(wù)體系。

三、人可溶程序性死亡因子(sPD-1)ELISA試劑盒標(biāo)本要求

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。

2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。

3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆�。�?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

四、人可溶程序性死亡因子(sPD-1)ELISA試劑盒操作流程

1.從室溫平衡20min后的鋁箔袋中取出所需板條，剩余板條用自封袋密封放回4℃。

2.設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔，標(biāo)準(zhǔn)品孔各加不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品50μL；

3.樣本孔中加入待測樣本50μL；空白孔不加。

4.除空白孔外，標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣本孔中每孔加入辣根過氧化物酶（HRP）標(biāo)記的檢測抗體100μL，用封板膜封住反應(yīng)孔，37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

5.棄去液體，吸水紙上拍干，每孔加滿洗滌液（350μL），靜置1min，甩去洗滌液，吸水紙上拍干，如此重復(fù)洗板5次（也可用洗板機(jī)洗板）。

6.每孔加入底物A、B各50μL，37℃避光孵育15min。

7.每孔加入終止液50μL，15min內(nèi)，在450nm波長處測定各孔的OD值。

五、人可溶程序性死亡因子(sPD-1)ELISA檢測試劑盒注意事項(xiàng)

1． 試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。

2.各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。

3.請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。

4.封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。

5.底物請避光保存。

6.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).

7.所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

8.本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。試劑盒2-8℃保存，有效期6個月

。本試劑盒僅供科研使用，不得用于臨床診斷

六、訂購流程

首先聯(lián)系我司客服專員，確定指標(biāo)名稱、規(guī)格、數(shù)量簽訂購銷合同，做合同需提供單位信息和收貨地址，其次按照合同賬號打款，安排發(fā)貨發(fā)票隨貨，最后收到貨請仔細(xì)檢查外包裝是否有破損，另外我司有完善的售后服務(wù)，如遇任何問題可先聯(lián)系客服處理，當(dāng)天都會有答復(fù)。

七、人可溶程序性死亡因子(sPD-1)ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制

以所測標(biāo)準(zhǔn)品的OD值為橫坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)品的濃度值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上或用相關(guān)軟件繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，并得到直線回歸方程，將樣品的OD值代入方程，計算出樣品的濃度。

八、特別說明

上海臻科長期專業(yè)供應(yīng)各類科研產(chǎn)品，包括ELISA試劑盒、生物試劑、培養(yǎng)基、檢測卡、染色液染色試劑盒等優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。公司本著客戶至上的原則為客戶提供高質(zhì)量高品質(zhì)的產(chǎn)品，公司承諾如有任何質(zhì)量的問題請打電話與我司工作人員聯(lián)系,免費(fèi)包退換（非人為因素造成的）。以上是上海臻科生物科技有限公司的產(chǎn)品介紹，如需了解更多可聯(lián)系我司客服專員。

上海臻科生物科技有限公司（Shanghai Zhen Ke Biological Technology Co., Ltd.）是一家專業(yè)從事“產(chǎn)品研發(fā)、市場銷售、技術(shù)服務(wù)”為一體的高科技生物技術(shù)公司。 臻科生物依托國內(nèi)外技術(shù)研發(fā)人才的優(yōu)勢，由留美資深科學(xué)家與數(shù)位國內(nèi)多年從事生物領(lǐng)域研究的博士、碩士等高校生物領(lǐng)域研究人員共同創(chuàng)立，在科學(xué)研究和醫(yī)療檢測領(lǐng)域享有極高的聲譽(yù)，自公司成立以來，公司的銷售額保持高速增長，企業(yè)規(guī)模不斷擴(kuò)大，研發(fā)產(chǎn)品包括elisa試劑盒，動物血制品，抗體，標(biāo)準(zhǔn)品，檢測卡，生化試劑等實(shí)驗(yàn)耗材等10萬余種類，公司長期致力于elisa試劑盒、生物試劑的研發(fā)，為客戶提供放免試劑盒 、ELISA試劑盒、PCR定量服務(wù)等一系列實(shí)驗(yàn)代測服務(wù)。

 主營產(chǎn)品: elisa試劑盒，動物血制品，病理染色液，標(biāo)準(zhǔn)品，檢測卡經(jīng)銷品牌： Abcam、CST、BD Pharmingen、Santa Cruz、Jackson、R&D、Merck Millipore、gibco、hyclone、Amresco、Bio-World、Bio-Rad、NEB、Sigma、Tocris、Corning、Axygen（未提及的品牌，我公司可以代購）

實(shí)驗(yàn)代做服務(wù)： 酶聯(lián)免疫ELISA、免疫組化（包埋，切片，HE）、放免試劑盒、Realtime PCR、流式細(xì)胞檢測等 臻科生物產(chǎn)品已被廣泛應(yīng)用于化學(xué)、化工、生命科學(xué)的基礎(chǔ)研究和開發(fā)應(yīng)用、疾病診斷與控制、人口與健康、生物技術(shù)等諸多領(lǐng)域，并銷往全國各地，公司客戶遍布國內(nèi)各大學(xué)、醫(yī)院、研究所、衛(wèi)生防疫、生物公司等單位，得到廣大客戶的一致好評。

我們的宗旨是：為客戶提供最優(yōu)質(zhì)的產(chǎn)品和服務(wù)。 臻科生物以技術(shù)為核心并擁有完善的市場營銷體系、現(xiàn)代化管理體系和專業(yè)化物流配送系統(tǒng)，zui大程度滿足國內(nèi)外生命科研人員的產(chǎn)品需求。公司專門設(shè)立優(yōu)質(zhì)完善的客服中心及技術(shù)中心，第一時間為客戶解決技術(shù)支持、產(chǎn)品跟蹤以及售后等相關(guān)問題，旨在生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)研究領(lǐng)域創(chuàng)造具有國際競爭力的自主知識產(chǎn)權(quán)品牌產(chǎn)品。歡迎社會各界朋友前來洽談業(yè)務(wù)，共創(chuàng)輝煌！