多藥耐藥蛋白/P-糖蛋白抗體(C端)MDR1/PGlycoprotein免疫組化試劑盒

本公司今日?qǐng)?bào)道:參數(shù)規(guī)格  
產(chǎn)品名稱: 多藥耐藥蛋白/P-糖蛋白抗體(C端)MDR1/PGlycoprotein免疫組化試劑盒
保存條件：不使用時(shí)取試劑盒中一抗保存-20℃，其他均保存 2-8 ℃規(guī)格價(jià)格：以IHC工作液每個(gè)樣品用量為100ul來計(jì)算，按照稀釋比例1:400來計(jì)算，本試劑盒中一抗規(guī)格100ul可以檢測(cè)400個(gè)樣品以上。

試劑盒特點(diǎn)：利用LAB-SA第二代技術(shù)生產(chǎn)的免疫組化檢測(cè)試劑，特點(diǎn)是高靈敏度，特異性強(qiáng)、定性定位準(zhǔn)確、背景清晰等、低倍景染色，直接滴加，操作方便，孵育時(shí)間短，適用于冷凍切片、石蠟切片及固定的細(xì)胞涂片。可用于檢測(cè)細(xì)胞、組織內(nèi)的特異性抗原。

溫馨提示：本檢測(cè)試劑盒適用于人、大小鼠，兔等絕大多數(shù)組織，但對(duì)于內(nèi)源性生物素含量比較豐富的組織（如腎臟、肝臟等），應(yīng)選用非生物素檢測(cè)系統(tǒng)，或用avdin 封閉。
產(chǎn)品特點(diǎn)
多藥耐藥蛋白/P-糖蛋白抗體(C端)MDR1/PGlycoprotein免疫組化試劑盒含試劑：

1、一抗（應(yīng)用：IHC-P=1:400-800 IHC-F=1:400-800 ）

2、無色試劑：內(nèi)源性過氧化物酶阻斷劑

3、試劑A：封閉用正常山羊血清工作液

4、試劑B：生物素標(biāo)記二抗工作液：生物素標(biāo)記羊抗兔IgG

5、試劑C：辣根酶標(biāo)記鏈酶卵白素工作液

6、顯色液D液 (棕色) 1ml

7、顯色液E液（白色）20ml
產(chǎn)品相冊(cè)

用戶自備試劑（用戶自行購買，亦可咨詢我公司客服購買）：

一、0.1M PBS (pH7.2-7.4)緩沖液：

PBS（phosphate buffered solution）即磷酸鹽緩沖液，能夠提供相對(duì)穩(wěn)定的離子環(huán)境和pH緩沖能力，是生物學(xué)中經(jīng)常使用的緩沖鹽溶液，用于分子克隆及細(xì)胞培養(yǎng)等，pH為7.2-7.4，與人體血液等滲，主要成分為磷酸二氫鉀、磷酸氫二鈉、氯化鈉以。

二、檸檬酸鈉抗原修復(fù)液：

可以用于石蠟切片、冰凍切片等樣品使用多聚甲醛、甲醛或其它醛類試劑固定后的抗原修復(fù)�？梢杂行�去除醛類固定試劑導(dǎo)致的蛋白之間的交聯(lián)，充分暴露石蠟切片等樣品中的抗原表位，從而大大改善免疫染色效果。

抗原修復(fù)方法：

方法1：沸水浴修復(fù)，將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于沸水浴環(huán)境，保持外部沸騰狀態(tài)15min，自然冷卻至室溫。

方法2：微波修復(fù)，將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于微波爐中，高火5min，�；�3min，中火5min，自然冷卻至室溫。

方法3：高壓修復(fù)，將盛有修復(fù)液和玻片的燒杯置于高壓鍋，上汽后修復(fù)2-5min，然后將高壓鍋置入涼水中，減壓至正常后取出玻片

抗原修復(fù)注意事項(xiàng)：

1）脫蠟水化的切片，應(yīng)避免因切片干燥，而至非特異性染色。

2）熱修復(fù)操作時(shí)務(wù)必謹(jǐn)慎，當(dāng)心燙傷。

3）熱修復(fù)時(shí)間過長易導(dǎo)致脫片，請(qǐng)注意控制時(shí)間。

三、DAB（二氨基聯(lián)苯胺）染色液：

過氧化物酶將使底物發(fā)生反應(yīng)，于反應(yīng)部位產(chǎn)生棕色沉淀物。標(biāo)本顯色時(shí)間一般為室溫 5~20分鐘，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察顯色況，顯色充分后應(yīng)將標(biāo)本及時(shí)脫水封固。

多藥耐藥蛋白/P-糖蛋白抗體(C端)MDR1/PGlycoprotein免疫組化試劑盒實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：

安裝步驟與維護(hù)一）一抗稀釋的準(zhǔn)備：

方法1. 實(shí)驗(yàn)前，將凍干粉抗體用無菌蒸餾水稀釋（或PBS稀釋），將稀釋后的抗體分裝5-10支（20ulx5支或10ulx10支），放入-20℃保存，用一支拿一支，避免反復(fù)凍溶。

方法2. 實(shí)驗(yàn)前,也可將凍干粉抗體用無菌蒸餾水稀釋50ul（或PBS稀釋50ul）成原液:再加50%甘油, 放入-20℃保存，用多少吸多少。

方法3. 預(yù)試驗(yàn)可做幾個(gè)梯度1：100、200、400背景高還可做上去，選一個(gè)適合的稀釋比例，再正式做。工作液的稀釋-使用抗體稀釋液。

二）DAB顯色液的制備實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備：在1毫升試劑E（DAB 底物液）中，加入1滴（約50微升）試劑D（DAB濃縮液），混合均勻，即配成DAB工作液。此溶液必須現(xiàn)用現(xiàn)配，配好后避光保存，6小時(shí)內(nèi)使用，剩余的液體應(yīng)棄去。標(biāo)本顯色時(shí)間一般為室溫 5~20分鐘，請(qǐng)?jiān)陲@微鏡下觀察顯色的情況，顯色充分后應(yīng)將標(biāo)本及時(shí)脫水封固。

多藥耐藥蛋白/P-糖蛋白抗體(C端)MDR1/PGlycoprotein免疫組化試劑盒步驟（建議方案）：

1、石蠟切片，常規(guī)脫蠟至水

2、蒸餾水沖洗，pbs 浸泡5 分鐘（如需采用抗原修復(fù)，在此步驟后進(jìn)行）。

3、3%雙氧水去離子水（無色液體）孵育15-20 分鐘，以消除內(nèi)源性過氧物酶活性。

4、滴加試劑A（藍(lán)色液體）室溫孵育15-20 分鐘，傾去，勿洗。

5、滴加適當(dāng)比例稀釋的一抗，37℃孵育2-3 小時(shí)或4℃過夜。

6、PBS 沖洗，3 分鐘3 次。

7、滴加試劑B（黃色液體），室溫或37℃孵育15-20 分鐘。

8、PBS 沖洗，3 分鐘3 次。

9、滴加試劑C（橙色液體），室溫或37℃孵育15-20 分鐘。

10、PBS 沖洗，3 分鐘3 次。

11、顯色劑顯色（DAB 或AEC）

12、自來水充分沖洗。

13、如果需要，可進(jìn)行復(fù)染，脫水，透明。

14、選擇適當(dāng)?shù)姆馄瑒┓馄��?br type="_moz" />

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